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17β ESTRADIOL
per analisi di routine
Determinazione immunoenzimatica del 17β-Estradiolo nel siero o plasma umano.

REF DKO003
DESTINAZIONE D’USO
2. PRINCIPIO DEL METODO
Metodo competitivo immunoenzimatico colorimetrico Il 17β-Estradiolo (antigene) presente nel campione, compete con l’antigene marcato con perossidasi nei concentrazione del 17β-Estradiolo nel siero o plasma confronti dell’anticorpo anti-17β-Estradiolo adsorbito su micropiastra (fase solida). La separazione libero- Il kit 17β Estradiol è destinato al solo uso di legato si ottiene mediante semplice lavaggio della fase solida. L’enzima presente nella frazione legata, catalizza la reazione tra il Substrato (H2O2) ed il TMB- 1. SIGNIFICATO CLINICO
Substrate (TMB), sviluppando una colorazione blu L’Estradiolo (17β-Estradiol) è un ormone sessuale. che vira al giallo dopo aggiunta della Stop solution Rappresenta l'estrogeno principale negli esseri (H2SO4). L’intensità del colore sviluppato è umani. L'Estradiolo ha effetto sul funzionamento inversamente proporzionale alla concentrazione del riproduttivo e sessuale, e interessa altri organi compresa la struttura dell'osso. Durante gli anni fertili La concentrazione di 17β-Estradiolo nel campione è la maggior parte dell’Estradiolo nelle donne è calcolata sulla base di una curva standard. prodotto dalle ovaie, piccole quantità sono prodotte dalla corteccia surrenale. Negli uomini, i testicoli 3. REATTIVI, MATERIALI E STRUMENTAZIONE
producono l’Estradiolo. Nel plasma l’Estradiolo è legato alla globulina legante gli ormoni sessuali 3.1. Reattivi e materiali forniti nel kit
(SHBG), e all'albumina, - soltanto la frazione libera è biologicamente attiva. La quantità di Estradiolo REF DCE002/0306-0
sierico nelle donne riflette soprattutto l'attività delle REF DCE002/0307-0
ovaie. I livelli di estrogeni durante la gravidanza REF DCE002/0308-0
aumentano costantemente fino al termine della REF DCE002/0309-0
stessa. Aumenti dei livelli di Estradiolo portano alla REF DCE002/0310-0
sintesi della placenta. Nelle donne in premenopausa, REF DCE002/0311-0
la produzione ovarica di Estradiolo è stimolata dall'ormone luteinizzante (LH) e dell'ormone follicolo- 2. 17β Estradiol Control (1 vial, 0,5 mL) stimolante (FSH) durante il ciclo mestruale. La concentrazione del Controllo è Lotto-specifica ed Nelle donne, i livelli di Estradiolo misurano la fertilità e le irregolarità mestruali e sono necessari per REF DCE045/0303-0
controllare la funzionalità dei follicoli ovarici durante l'induzione dell’ ovulazione. Nelle donne, l’Estradiolo 17β-Estradiolo coniugato con perossidasi di rafano funge da ormone per lo sviluppo dei tessuti degli REF DCE002/0302-0
organi riproduttivi e guida lo sviluppo delle 4. Coated Microplate (1 micropiastra breakable) caratteristiche sessuali secondarie, esso è coinvolto Anti-17β-Estradiolo adsorbito su micropiastra anche nella fertilità maschile.L’Estradiolo regola il REF DCE002/0303-0
mantenimento della massa ossea. Donne in menopausa subiscono una perdita accelerata della 5. 10X Conc. Wash Solution (1 flacone, 50 mL) massa dell'osso dovuta alla mancanza di estrogeni. REF DCE054-0
L’Estradiolo interessa la sintesi delle proteine, come le lipoproteine, delle proteine carrier e delle proteine H2O2-TMB (0,26 g/L) (evitare il contatto con la pelle) responsabili della coagulazione. Gli estrogeni hanno REF DCE004-0
funzione neuroprotettiva. L’Estradiolo, per la sua attività, è coinvolto in alcuni tipi di cancro, come il cancro al seno e il cancro del rivestimento uterino. In Acido Solforico 0,15 M (evitare il contatto con la pelle) più ci sono parecchie circostanze ginecologiche REF DCE005-0
benigne che dipendono dagli estrogeni quali ad 3.2. Reattivi necessari non forniti nel kit
• Per la riproducibilità dei risultati, è importante che il tempo di reazione di ogni pozzetto sia lo stesso. 3.3. Materiale ausiliario e strumentazione
dispensazione degli reagenti, il tempo di estendersi oltre i 10 minuti. Se si protrae oltre, si Note
raccomanda di seguire lo stesso ordine di Conservare tutti i reattivi a 2÷8°C, al riparo dalla dispensazione. Se si utilizza più di una piastra, si raccomanda di ripetere la curva di calibrazione in Aprire la busta del Reattivo 4 (Coated Microplate) solo dopo averla riportata a temperatura ambiente e • L’addizione del TMB Substrato dà inizio ad una chiuderla subito dopo il prelievo delle strip da reazione cinetica, la quale termina con l’addizione della Stop Solution. L’addizione del TMB Substrato e della Stop Solution deve avvenire 4. AVVERTENZE
nella stessa sequenza per evitare tempi di • Questo test kit è per uso in vitro, da eseguire da • Osservare le linee guida per l’esecuzione del • Usare i previsti dispositivi di protezione individuale controllo di qualità nei laboratori clinici testando mentre si lavora con i reagenti forniti. • Alcuni reagenti contengono piccole quantità di Proclin 300R come conservante. Evitare il contatto ricostituzione e dispensazione dei reagenti. contaminati, altamente lipemici o emolizzati. • Il TMB Substrato contiene un irritante, che può • I lettori di micropiastre leggono l’assorbanza essere dannoso se inalato, ingerito o assorbito verticalmente. Non toccare il fondo dei pozzetti. attraverso la cute. Per prevenire lesioni, evitare l’inalazione, l’ingestione o il contatto con la cute e 6. PROCEDIMENTO
• La Stop Solution è costituita da una soluzione di 6.1. Preparazione degli standards (S0…S5)
acido solforico diluito. L’acido solforico è velenoso Standards pronti all’uso. Agli Standards corrispondono e corrosivo e può essere tossico se ingerito. Per le seguenti concentrazioni di 17β-Estradiolo: prevenire possibili ustioni chimiche, evitare il • Evitare l’esposizione del reagente TMB/H luce solare diretta, metalli o ossidanti. Non Una volta aperti sono stabili a 2-8°C per sei mesi. concentrazioni di 17β-Estradiolo da 20 pg/mL a 6.2. Preparazione del coniugato
Coniugato pronto all’uso. Mescolare delicatamente • La somministrazione di steroidi naturali o sintetici per almeno 5 minuti su agitatore rotante. può alterare i livelli ematici di 17β-Estradiolo. Stabile 6 mesi a 2÷8°C dall’apertura del flacone 5. PRECAUZIONI
6.3. Preparazione della Wash Solution
• Si prega di attenersi rigorosamente alla sequenza Prima dell’uso, diluire il contenuto del flacone della dei passaggi indicata in questo protocollo. “10X Conc. Wash Solution” con acqua distillata fino al • Tutti i reattivi devono essere conservati a volume di 500 mL. Per preparare volumi minori temperatura controllata di 2-8°C nei loro rispettare il rapporto di diluizione di 1:10. La contenitori originali. Eventuali eccezioni sono soluzione di lavaggio diluita è stabile a 2÷8°C per almeno 30 giorni. Nella wash solution concentrata è possibile osservare la presenza di cristalli, in tal caso • Prima dell’uso lasciare tutti i componenti dei kit e i agitare a temperatura ambiente fino a completa campioni a temperatura ambiente (22-28°C) e dissoluzione dei cristalli, per una maggiore precisione diluire tutto il flacone della soluzione di lavaggio • Non scambiare componenti dei kit di lotti diversi. concentrata a 500 mL avendo cura di trasferire anche Devono essere osservate le date di scadenza i cristalli, poi agitare fino a completa dissoluzione. riportate sulle etichette della scatola e di tutte le fiale. Non utilizzare componenti oltre la data di 6.4. Preparazione dei Campioni
La determinazione del 17β-Estradiolo può essere • Qualora si utilizzi strumentazione automatica, è responsabilità dell’utilizzatore assicurarsi che il kit Se il dosaggio non viene effettuato lo stesso giorno del prelievo conservare il campione a -20°C. • Un lavaggio incompleto o non accurato dei Prima dell’uso lasciare almeno 5 minuti su agitatore pozzetti può causare una scarsa precisione e/o 6.5. Procedimento
8. RISULTATI
Poiché è necessario operare in doppio, allestire due pozzetti per ogni punto della curva Standard (S0-S5), 8.1. Estinzione media
due per ogni Campione, due per il Controllo ed uno Calcolare l’estinzione media (Em) di ciascun punto della curva standard (S0 –S5) e di ogni campione. Campione
8.2. Curva standard
Reagente
Standard
/Controllo
Tracciare sul grafico delle assorbanze i valori calcolati delle estinzioni medie (Em) di ciascuno standard (S0 –S5) in funzione delle concentrazioni. Tracciare la miglior curva passante per i punti 8.3. Calcolo dei risultati
Interpolare, dal grafico, i valori di assorbanza relativi a ciascun campione e leggerne la corrispondente Rimuovere il contenuto da ogni pozzetto, lavare i pozzetti per tre volte con 300 µL di wash solution 9. VALORI DI RIFERIMENTO
Le concentrazioni seriche di 17β-Estradiolo sono Incubare 30 minuti a temperatura ambiente 22÷28°C, Agitare delicatamente la micropiastra. Leggere l’assorbanza (E) a 450 nm contro il Bianco. 7. CONTROLLO QUALITA’
10. PARAMETRI CARATTERISTICI
Ogni laboratorio dovrebbe analizzare i campioni nella gamma dei livelli elevati, normali e bassi di Estradiolo 10.1. Precisione
per il controllo delle prestazioni dell’analisi. Questi campioni dovrebbero essere trattati come ignoti ed i La variabilità all’interno dello stesso kit è stata valori determinati in ogni test effettuato. Le tabelle di determinata replicando (10x) tre differenti campioni controllo qualità dovrebbero essere effettuate per sierici. La variabilità intra-assay è ≤ 9%. seguire le prestazioni dei reagenti forniti. Metodi statistici adeguati dovrebbero essere impiegati per La variabilità tra kit differenti è stata determinata accertare il trend. Il laboratorio dovrebbe fissare i replicando tre differenti sieri di controllo con kit limiti di accettabilità di prestazioni dell’analisi. Altri appartenenti a lotti diversi. La variabilità inter-assay è includono le intercette di 80, 50 e 20% della curva standard per valutare la riproducibilità. In più, la 10.2. Accuratezza
capacità di assorbimento massima dovrebbe essere La prova di diluizione condotta su campioni ad alta costante con l’esperienza precedente. La deviazione concentrazione di 17β Estradiolo, ha dato un valore di significativa dalle prestazioni stabilite può indicare il recupero medio (±SD) di 95,69 % ± 7,74%. cambiamento inosservato negli stati sperimentali o La prova di recupero condotta su campioni arricchiti nella degradazione dei reagenti del kit. Reagenti freschi dovrebbero essere usati per determinare il con 120 - 240 - 480 - 960 pg/mL di 17β Estradiolo, ha dato un valore medio (±SD) di 101,09% ± 5,42%. 7.1. Interpretazione dei risultati
10.3. Sensibilità
Se per calcolare i risultati è stato usato il computer, è La concentrazione minima di 17β Estradiolo calcolata imperativo che i valori dei calibratori cadano entro il sottraendo 2 x S.D. alla media di 10 replicati dello standard 0 è risultata pari a 8,68 pg/mL 10.4. Specificità
L’anticorpo impiegato presenta le seguenti reazioni crociate, calcolate al 50% secondo Abraham: 10.5. Correlazione con kit commerciale
Il kit 17β Estradiolo Diametra è stato comparato con
un kit disponibile in commercio. Sono stati testati 16
campioni di siero.
La curva di regressione è:
(17β-Estradiolo Dia)=1,03*(17β-Estradiolo Ref)-12,96
r2 = 0,996
11. DISPOSIZIONI PER LO SMALTIMENO
I reagenti devono essere smaltiti in accordo con le
leggi locali.

BIBLIOGRAFIA
• Joshi,U.M., Steroids 34 (1) 35 (1979)
• D.Exley and R. Abuknesha Febs Letters 91,(2) 162
• Ismail A.A, et al J.Clin.Endocrin.Metab. 34,177-184 • Rajkowski,K.M, et al Steroids 29-5 (1977) • Wisdom G.B. Clin. Chem. 22/8, 1243-1255 (1976) • D. Sadem, et al J. of Immunolog. Methods 28 125-
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17β ESTRADIOL
for routine analysis
Immunoenzymatic determination of 17β-Estradiol in human serum or plasma.

REF DKO003
INTENDED USE
2. PRINCIPLE
Competitive immunoenzymatic colorimetric method 17β-Estradiol (antigen) in the sample competes with for quantitative determination of 17β-Estradiol labelled-antigen) for binding onto the limited number 17β Estradiol kit is intended for laboratory use only. of anti 17β-Estradiol (antibody) sites on the 1. CLINICAL SIGNIFICANCE
After incubation, the bound/free separation is Estradiol (17β-Estradiol) is a sex hormone. It performed by a simple solid-phase washing. The represents the major estrogen in humans. Estradiol enzyme in the bound-fraction reacts with the has not only a critical impact on reproductive and Substrate (H2O2) and the TMB Substrate and sexual functioning, but also affects other organs develops a blu color that changes into yellow when including bone structure. During the reproductive years most Estradiol in women is produced by the The colour intensity is inversely proportional to the ovaries, smaller amounts of Estradiol are also 17β-Estradiol concentration in the sample. produced by the adrenal cortex. In men, the testes 17β-Estradiol concentration in the sample is produce Estradiol. In plasma Estradiol is largely bound to sex hormone binding globulin (SHBG), also to albumin, only a fraction is free and biologically 3. REAGENT, MATERIAL AND INSTRUMENTATION
active. Serum Estradiol measurement in women reflect primarily the activity of the ovaries. During 3.1. Reagent and material supplied in the kit
pregnancy estrogen levels, including Estradiol, rise steadily towards term. Estradiol increases due to REF DCE002/0306-0
placental production. In adult premenopausal women, REF DCE002/0307-0
ovarian production of Estradiol is stimulated by REF DCE002/0308-0
luteinizing hormone (LH) and the follicle-stimulating REF DCE002/0309-0
hormone (FSH) during the menstrual cycle. REF DCE002/0310-0
In adult women, Estradiol levels are measured in the REF DCE002/0311-0
evaluation of fertility and menstrual irregularities, and to monitor ovarian follicular function during induction 2. 17β-Estradiol Control (1 vial, 0.5 mL) of ovulation. In the female, Estradiol acts as a growth Concentration of Control is Lot-specific and is hormone for tissue of the reproductive organs. The development of secondary sexual characteristics in REF DCE045/0303-0
women is driven by Estradiol. Estradiol is involved also in man fertility. Estradiol regulates the bone 17β-Estradiol conjugated with horseradish peroxidase maintenance. Post-menopause women experience REF DCE002/0302-0
an accelerated loss of bone mass due to a relative 4. Coated Microplate (1 microplate breakable) Anti-17β-Estradiol adsorbed on microplate Estradiol affects the production of multiple proteins REF DCE002/0303-0
including lipoproteins, binding proteins, and proteins 5. 10X Conc. Wash Solution (1 vial, 50 mL) responsible for blood clotting. Estrogens have been REF DCE054-0
found to have neuroprotective function. The Estradiol, for his activities, is involved in some types of cancer such as breast cancer and cancer of the uterine lining. In addition there are several benign REF DCE004-0
gynecologic conditions that are dependent on estrogen such as endometriosis, leiomyomata uteri, REF DCE005-0
more than one plate is used, it is recommended to 3.2. Reagents necessary not supplied in the
repeat the dose response curve in each plate • Addition of the TMB Substrate solution initiates a kinetic reaction, which is terminated by the 3.3. Auxiliary materials and instrumentation
addition of the Stop Solution. Therefore, the TMB Substrate and the Stop Solution should be added in the same sequence to eliminate any time Notes
• Observe the guidelines for performing quality Store all reagents between 2÷8°C in the dark. control in medical laboratories by assaying Open the bag of reagent 4 (Coated Microplate) only when it is at room temperature and close it • Maximum precision is required for reconstitution • Samples microbiologically contaminated should 4. WARNINGS
not be used in the assay. Highly lipemeic or • This kit is intended for in vitro use by professional haemolysed specimens should similarly not be • Use appropriate personal protective equipment • Plate readers measure vertically. Do not touch the while working with the reagents provided. • Some reagents contain small amounts of Proclin 300R as preservatives. Avoid the contact with skin 6. PROCEDURE
• The TMB Substrate contains an irritant, which 6.1. Preparation of the Standards (S0….S5)
may be harmful if inhaled, ingested or absorbed The Standards are ready to use. The Standards have through the skin. To prevent injury, avoid the following concentration of 17β-Estradiol: inhalation, ingestion or contact with skin and eyes. • The Stop Solution consists of a diluted sulphuric acid solution. Sulphuric acid is poisonous and corrosive and can be toxic if ingested. To prevent Stability: until the expiry date printed on the kit. chemical burns, avoid contact with skin and eyes. Once opened, the standards are stable six months at • Avoid the exposure of reagent TMB/H2O2 to • This method allows the determination of 17β- 6.2. Preparation of the conjugate
The conjugate is ready to use. Mix gently, for 5 determination can be invalidated if the patient was Once opened, it is stable six months at 2÷8°C treated with cortisone or natural or synthetic 6.3. Preparation of Wash Solution
Dilute the content of the vial “Conc. Wash Solution 5. PRECAUTIONS
10X” with distilled water to a final volume of 500 mL • Please adhere strictly to the sequence of pipetting prior to use. For smaller volumes respect the 1:10 dilution ratio. The diluted wash solution is stable for • All reagents should be stored refrigerated at 2-8°C 30 days at 2÷8°C. In concentrated wash solution is in their original container. Any exceptions are possible to observe the presence of crystals, in this case mix at room temperature until complete • Allow all kit components and specimens to reach dissolution of crystals, for greater accuracy dilute the room temperature (22-28°C) and mix well prior to whole bottle of concentrated wash solution to 500 mL taking care also to transfer crystals, then mix until crystals are completely dissolved. • Do not interchange kit components from different lots. The expiry dates printed on the labels of the 6.4. Preparation of the sample
box and of the vials must be observed. Do not use The determination of 17β-Estradiol can be performed any kit component beyond their expiry date. • If you use automated equipment is your Store the sample at -20°C if the determination is not responsibility to make sure that the kit has been performed on the same day of the sample collection. Before using, mix gently, for 5 minutes, with a rotating • The incomplete or inaccurate liquid removal from the wells could influence the assay precision • It is important that the time of reaction in each well is held constant for reproducible results. Pipetting of samples should not extend beyond ten minutes to avoid assay drift. If more than 10 minutes are needed, follow the same order of dispensation. If 6.5. Procedure
8. RESULTS
As it is necessary to perform the determination in duplicate, prepare two wells for each point of the 8.1. Mean Absorbance
standard curve (S0-S5), two for each sample, two for Calculate the mean of the absorbance (Em) for each point of the standard curve and of each sample 8.2. Standard curve
Standard
Plot the mean value of absorbance of the standards (Em) against concentration. Draw the best-fit curve through the plotted points. (es: Four Parameter 8.3. Calculation of results
Interpolate the values of the samples on the standard curve to obtain the corresponding values of the concentrations expressed in pg/mL. Remove the contents from each well, wash the wells 9. REFERENCE VALUES
three times with 300 µL of diluted wash solution The serum 17β-Estradiol reference values are: Incubate at room temperature (22÷28°C) for 30 CHILDREN
Read the absorbance (E) at 450 nm against Blank. 10. PERFORMANCE AND CHARACTERISTICS
10.1. Precision
7. QUALITY CONTROL
Each laboratory should assay controls at normal, high Within run variation was determined by replicate and low levels range of Estradiol for monitoring assay measurments (10x) of three different human sera in performance. These controls should be treated as one assay. The within assay variability is ≤ 9%. unknowns and values determined in every test procedure performed. Quality control charts should Between run variation was determined by replicate be maintained to follow the performance of the measurements of three different human sera in supplied reagents. Pertinent statistical methods different lots. The between assay variability is ≤ 10 %. should be employed to ascertain trends. The individual laboratory should set acceptable assay 10.2. Accuracy
performance limits. Other parameters that should be The dilution test conducted with high concentration monitored include the 80, 50 and 20% intercepts of samples of 17β-Estradiol gave an average recovery the standard curve for run-to-run reproducibility. In value (±SD) of 95.69% ± 7.74% with reference to the addition, maximum absorbance should be consistent with past experience. Significant deviation from The recovery of 120 – 240 – 480 – 960 pg/mL of 17β- established performance can indicate unnoticed Estradiol added to samples gave an average value change in experimental conditions or degradation of (±SD) of 101.09% ± 5.42% with reference to the kit reagents. Fresh reagents should be used to determine the reason for the variations. 10.3. Sensitivity
7.1. Interpretation
The lowest detectable concentration of 17β-Estradiol If computer controlled data reduction is used to calculate subtracting 2 X S.D. to the media of then calculate the results of the test, it is imperative that replicates of zero standard is 8.68 pg/mL. the predicted values for the calibrators fall within 10% of the assigned concentrations. 10.4. Specificity
The cross reaction of the antibody calculated at 50% according to Abraham are shown in the table:
10.5. Correlation with a commercial kit

Diametra 17β-Estradiol ELISA was compared to
another commercially available 17β-Estradiol assay.
16 serum samples were analysed in both test
systems. The linear regression curve was calculated:
(17β-Estradiol Dia)=1.03*(17β-Estradiol Ref)-12.96
r2 = 0.996
11. WASTE MANAGEMENT
Reagents must be disposed off in accordance with
local regulations.

BIBLIOGRAPHY
• Joshi,U.M., Steroids 34 (1) 35 (1979)
• D.Exley and R. Abuknesha Febs Letters 91,(2)
• Ismail A.A, et al J.Clin.Endocrin.Metab. 34,177- • Rajkowski,K.M, et al Steroids 29-5 (1977) • Wisdom G.B. Clin. Chem. 22/8, 1243-1255 (1976) • D. Sadem, et al J. of Immunolog. Methods 28 125-
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Spiegazione dei simboli Explanation of symbols Explication des symboles Significado de los simbolos
DE
Verwendete Symbole Explicaçao dos simbolos Producto sanitario para diagnóstico In vitro Dispositif medical de diagnostic in vitro Dispositivos medicos de diagnostico in vitro Establa hasta (usar antes de último día del mes) Utiliser avant (dernier jour du mois indiqué) Utilizzare prima del (ultimo giorno del mese) Contém o suficiente para “n” testes DIA.METRA SRL
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SUGGERIMENTI PER LA RISOLUZIONE DEI PROBLEMI/TROUBLESHOOTING
ERRORE CAUSE POSSIBILI/ SUGGERIMENTI
Nessuna reazione colorimetrica del saggio
- mancata dispensazione del coniugato
- contaminazione del coniugato e/o del Substrato
- errori nell’esecuzione del saggio (es. Dispensazione accidentale dei reagenti in sequenza errata o provenienti da
flaconi sbagliati, etc.)
Reazione troppo blanda (OD troppo basse)
- coniugato non idoneo (es. non proveniente dal kit originale)
- tempo di incubazione troppo breve, temperatura di incubazione troppa bassa
Reazione troppo intensa (OD troppo alte)
- coniugato non idoneo (es. non proveniente dal kit originale)
- tempo di incubazione troppo lungo, temperatura di incubazione troppa alta
- qualità scadente dell’acqua usata per la soluzione di lavaggio (basso grado di deionizzazione,)
- lavaggi insufficienti (coniugato non completamente rimosso)
Valori inspiegabilmente fuori scala
- contaminazione di pipette, puntali o contenitori- lavaggi insufficienti (coniugato non completamente rimosso)
CV% intra-assy elevato
- reagenti e/o strip non portate a temperature ambiente prima dell’uso
- il lavatore per micropiastre non lava correttamente (suggerimento: pulire la testa del lavatore)
CV% intersaggio elevato
- condizioni di incubazione non costanti (tempo o temperatura)
- controlli e campioni non dispensati allo stesso tempo (con gli stessi intervalli) (controllare la sequenza di
dispensazione)
- variabilità intrinseca degli operatori
ERROR POSSIBLE CAUSES / SUGGESTIONS
No colorimetric reaction
- no conjugate pipetted reaction after addition
- contamination of conjugates and/or of substrate
- errors in performing the assay procedure (e.g. accidental pipetting of reagents in a wrong sequence or from the
wrong vial, etc.)
Too low reaction (too low ODs)
- incorrect conjugate (e.g. not from original kit)
- incubation time too short, incubation temperature too low
Too high reaction (too high ODs)
- incorrect conjugate (e.g. not from original kit)
- incubation time too long, incubation temperature too high
- water quality for wash buffer insufficient (low grade of deionization)
- insufficient washing (conjugates not properly removed)
Unexplainable outliers
- contamination of pipettes, tips or containers
insufficient washing (conjugates not properly removed) too high within-run
- reagents and/or strips not pre-warmed to CV% Room Temperature prior to use
- plate washer is not washing correctly (suggestion: clean washer head)
too high between-run - incubation conditions not constant (time, CV % temperature)
- controls and samples not dispensed at the same time (with the same intervals) (check pipetting order)
- person-related variation

Source: http://www.xlab.ro/data_files/product_documents/65/dcm_20003-9_20ifu_2017b_20estradiol_20ce_20_28dal_20lotto_202566_29.pdf

Standarder, rekommenderat handhavande och strategier

International Association of Sound and Audiovisual Archives Internationella Sammanslutningen av Ljud- och Audiovisuella Arkiv Technical Committee Tekniska kommittén Standards, Recommended Practices and Strategies Standarder, rekommenderad hantering och strategier IASA-TC 03 Säkrandet av det ljudande arvet: etik, principer och bevarandestrategier V

Medication nursing standing orders for emergency care

TEAYS VALLEY LOCAL SCHOOL DISTRICT MEDICATION IN SCHOOL Scheduling of medication or treatment outside of school hours is encouraged . When that is not possible, a specific policy must be followed. We allow prescribed medication to be taken. However, we must have a written permission from the parent and the physician's signed verification. Medication must be received in the containe

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