Revista ciencia y desarrollo .

Ciencia & Desarrollo
Recibido: 07/09/2011 Aceptado: 30/11/2011 Estudio Toxicológico con Dosis Subaguda de Proustia
Berberidifolia (tasa) en ratas de Laboratorio
Toxicological Study with Subacute Dose of Proustia RESUMEN:
Se diseñó un estudio prospectivo, longitudinal, de intervención, comparativo-explicativo paraprobar la hipótesis: que la administración (300mg/kg pc) en forma prolongada del extracto acuosode Proustia berberidifolia (tasa), a la cual la creencia popular le atribuye propiedades terapéuticas,produce modificaciones negativas en los parámetros bioquímicos sanguíneos de rattus norvegicusde la variedad ways, los cuales se midieron al inicio, catorce y veintiocho días. Objetivo: Fueestablecer el efecto del extracto sobre la bioquímica sanguínea. Material y métodos: El extracto sepreparó a base de planta seca y estabilizada. Se administró mediante sonda gástrica. Se utilizaroncinco animales de cada sexo con sus respectivos controles haciendo un total de veinte. Los gruposcontrol en lugar de extracto recibieron agua. Resultados: bilirrubinas, transaminasas y colesteroltotal modificadas. Conclusiones: Contradictoriamente las modificaciones observadas sonpositivas y están relacionados con efectos depurador, desintoxicador hepatoprotector ehipolipemiante. Palabras clave: Depurador, desintoxicador, hepatoprotector. ABSTRACT:
It was designed a prospective, longitudinal, intervention, explanatory-comparative study to test thehypothesis: that the administration (300mg/kg bw) in a prolonged way of berberidifolia Proustiaaqueous extract (tasa), to which popular belief attributed therapeutical properties produces adversechanges in blood biochemical parameters of the variety rattus norvegicus Ways, which aremeasured at the beginning, fourteen and twenty-eight days. Objective: to establish the effect of theextract on blood chemistry and methods The extract is prepared from dried plant and stabilized. Itwas administered by gavage. Five animals of each sex with their respective controls for a total oftwenty were used. Control groups received water instead of the extract. Results: bilirubin,transaminases and total cholesterol modified Conclusions:Contradictorily to the observedchanges, they are positive and are related to effects debugger, hepatoprotective detoxifying and lipidlowering. Keywords: debugger, detoxifier, hepatoprotective. ¹ Doctor en Ciencias de la Salud, Mgr en fisiopatología, Químico Farmacéutico. Facultad de Ciencias de la Salud Universidad Nacional JorgeBasadre Grohmann Revista Ciencia y Desarrollo 2011; 13: 145-151 Estudio toxicológico con Dosis Subaguda de Proustia Berberidifolia (tasa) en ratas de Laboratorio
I. INTRODUCCIÓN
Al final, la complementación con más estudioscientíficos sobre esta planta permitirá producir una Mucho se ha escrito acerca de la antigüedad del uso de nueva categoría de fármaco (fitofármaco) donde se las plantas medicinales como recurso terapéutico fusiona el conocimiento ancestral etnobotánico y popular (Carretero, 1998). Como se sabe una planta está etnomédico; sumados a los modernos conocimientos en constituida por una variedad de compuestos químicos de farmacología y tecnología farmacéutica obteniéndose mayor o menor complejidad y son estos componentes así un producto a base de un extracto natural los que interactúan con una gran diversidad de estandarizado con una forma farmacéutica adecuada moléculas biológicas que pueden ser receptores de la que no guarda diferencia en su aspecto y calidad con los membrana celular y/o citoplasmáticos, sistemas medicamentos alopáticos tradicionales y estará en transportadores de iones, enzimas etc. Esta nuestros anaqueles como una alternativa más para la característica determina que estos sistemas biológicos prescripción cuando de enfermedades o de proteger el en equilibrio, por la presencia de sustancias complementarias (Rodriguez, 1998), no actúan porfuerzas inexplicables o desconocidas, muy por el II. MATERIALES Y MÉTODOS.
contrario, está cada vez mas establecido que lo hacenpor las mismas vías utilizadas por los medicamentos El trabajo de investigación desarrollado fue analítico llamados convencionales y no pocas veces, a través de experimental (prospectivo, longitudinal, de varias vías simultáneas, en lo que se denomina acción intervención, comparativo-explicativo) donde se usaron dos poblaciones y se procedió considerando la Tabla Nº1. El tratamiento estadístico fué inferencial, Anova De allí que existan antecedentes de interacciones entre factorial de tres y dos factores con efectos fijos, medicamentos y plantas medicinales (Chan, 2000; multivariable multigrupos aleatorizado, cada unidad de Duclos, 2001 e Izzo, 2001), sin embargo, lo cierto es, análisis (rata) bajo un solo tratamiento con un número de que conforme avanzan las investigaciones se observan que unas plantas medicinales son realmente eficacespara ciertos tratamientos (Izzo, 2001 y Luper, El método utilizado fue el de administración oral pero a la vez pueden producir reacciones adversas como continuada (28 días) y el material biológico estuvo dermatitis (Schatzle, 1998), hemorragia intracerebral constituido por 20 ratas albinas (Rattus norvegicus 10 (Matthews, 1998), anafilaxia (Myer, 1998), colestasis ratas hembras, 10 ratas machos ) jóvenes y sanas de seis (Tomas, 1998) nefrotoxicidad (Conz, 1998), hepatitis meses, similar peso que no sobrepasaron +-20% del (Gaviln, 1999), ginetomastia (Palop, 1999), síndrome valor medio pertinente Las hembras fueron nulíparas y de Fanconi (Krumme, 2001) como se describe en el sistema Español de Farmacovigilancia (F.E.D.R.A).
Se mantuvo constantes las condiciones de temperatura, Por lo tanto de manera similar a los medicamentos humedad, iluminación, oscuridad natural y alopáticos, se aconseja usar las plantas con cautela en alimentación durante los días que duro la investigación.
ciertos grupos de personas, especialmente: niños(Tomassoni, 2001), personas de tercera edad (Parkman, Los animales antes de entrar al tratamiento fueron 2001), así como en pacientes con patologías renales preparados, la vía de administración utilizada fue la oral.
(Foote, 2001) y enfermos con cáncer (Oneschuk, 1999).
La forma farmacéutica fue extracto que fue preparado enel momento de las administraciones.
En la medida que las plantas medicinales cuenten con unrespaldo científico (Price, 1982 y Bourgoignic 1981) Los parámetros de bioquímica clínica estudiados en la avalados por ensayos farmacológicos y toxicológicos muestra de sangre obtenida fueron realizados por tanto in vitro como in vivo así como por ensayos clínicos III. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Se debe considerar también, que a pesar del aumento delas investigaciones y estudios científicos en este campo, Los resultados se presentan en la Tablas 2,3 y 4, y en las todavía no se conocen los principios activos Figuras 1, 2 y 3 se presenta el comportamiento de LDL- responsables de las cualidades de muchas de ellas colesterol pos administración del extracto acuoso de (Myer, 1998); en consecuencia habrá que cuestionarse proustia berberidifolia.(tasa). La administración del la seguridad de la utilización de plantas de composición extracto acuoso de Proustia berberidifolia (tasa) a incierta ( Woo, 1979) y más aún si su consumo va a ser animales de experimentación afecta el funcionamiento por tiempo prolongado. Por eso que toda planta a la que hepático más no el renal. Se midió la actividad de la la población le atribuya bondades terapéuticas antes de mayoría de enzimas indicadoras de daño celular así administrarse a los seres humanos deben ser sometidas a como los parámetros bioquímicos indicadores de ensayos rigurosos. Nuestro trabajo de investigación alteraciones metabólicas y en determinados casos se sobre la Proustia berberidifolia (tasa) aporta acompañó de pruebas destinadas a medir la capacidad información científica importante sobre los efectos funcional de órganos específicamente de los encargados benéficos a nivel hepático que tienen repercusión en el de la metabolización o eliminación de un toxico o metabolito presente después de la ingesta de unxenobiótico.
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Tabla Nº 1 Matriz de Operacionalización
Variables
Criterios
Procedimientos
Indicad.
Subindicadores
Medición
Tabla Nº 2 : Efecto Intersujetos Medición
Eta al Cuadrado
Variables Dependientes
Significación
Nivel De Efecto
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Tabla Nº 3: Efecto Intersujetos Medición
Eta al Cuadrado
Variables Dependientes
Significación
Nivel de Efecto
Tabla Nº 4: Efectos Intersujetos Tratamiento
Variables
Eta al Cuadrado
Significación
Nivel de Efecto
Dependientes
Uno de estos órganos de gran importancia por su pruebas en el presente trabajo por la extensión del nobleza y múltiples funciones es el hígado. Se estima que lleva a cabo más de 500 actividades distintas, entrelas que se encuentra la de desintoxicación, y cuando deja La bilirrubina producto final del catabolismo del grupo de funcionar se produce la muerte del organismo a las 10 Hem (hemoglobina, citocromo P450) se produce en el horas (Price, 1982). Es un órgano con propiedades de sistema retículo endotelial y de allí pasa a la circulación regeneración total y tiene una capacidad de reserva siendo trasportada al hígado unida a la albúmina considerable que le permite funcionar dentro de límites (bilirrubina indirecta insoluble en agua). El hígado lo normales hasta que 80% de los hepatocitos se han conjuga con ácido glucorónico (bilirrubina directa destruido (Price, 1982). Las pruebas de evaluación de la soluble en agua) y lo excreta a la bilis. En el intestino por función hepática se basan en la enorme gama de degradación bacteriana se transforma en urobilinógeno reacciones que allí ocurren, entre estas pruebas que pasa a las deposiciones. Alteraciones en la destacamos las diseñadas para medir la capacidad formación de bilirrubina, transporte o conjugación dan funcional (bilirrubina, carbohidratos, lípidos, proteínas origen a un aumento de bilirrubina indirecta, en cambio y urea, entre otras), para medir la capacidad una alteración de la excreción origina un aumento de la desintoxicadora (bilirrubina, amoniaco, alcohol, bilirrubina conjugada. La excreción inadecuada de fármacos) para medir la capacidad excretora o secretora bilirrubina conjugada puede ser producto de una (ácidos biliares, colesterol, bilirrubina), para medir la obstrucción intra como extrahepática producida por una capacidad almacenadora de: glucógeno, lípidos, sustancia extraña, lo que no permiten hacer un aminoácidos y proteínas, hierro, cobre, vitaminas) para diagnóstico diferencial pero mientras más elevado sea el detectar daño celular del hepatocito (transaminasas) y valor más probable es que la obstrucción sea de la vía biliar (bilirrubina directa, bilirrubina total y extrahepática. En este estudio se demuestra que con la fosfatasa alcalina), y por último para medir la capacidad administración de la tasa varían indirectamente los inmunológicas (fagocitosis, limpieza de bacterias entre niveles de bilirrubina total, bilirrubina indirecta por una otras sustancias extrañas, secreción de IgA, defensas óptima conjugación a nivel hepático. En concreto se ha humorales), y también diagnosticar la etiología de la mejorado la capacidad funcional del hígado, en especial enfermedad, no siendo consideradas estas dos últimas su capacidad excretora y desintoxicadora como lo Revista Ciencia y Desarrollo 2011; 13: 145-151 Estudio toxicológico con Dosis Subaguda de Proustia Berberidifolia (tasa) en ratas de Laboratorio
demostraremos más adelante, no existiendo obstrucción proceso subagudo maligno a nivel hepático.
intrahepática ni a nivel biliar lo que se corrobora con losniveles de fosfatasa alcalina encontrados que no En cuanto a la descomposición de proteínas y presentaron variación alguna no comprometiendo otro aminoácidos, es la urea el producto final la cual se órgano abdominal o estructura abdominal aledaña como sintetiza en el hígado, se excreta por los riñones y la puede ser el páncreas. Aunque se desconoce el cuarta parte de esta se metaboliza en los intestinos para mecanismo exacto que desencadena el ataque formar amoniaco y dióxido de carbono mediante la pancreático, con frecuencia (75%) se relaciona con actividad de la flora bacteriana normal (Woo y Canon, enfermedades de los conductos biliares o alcoholismo 1979). Posteriormente este amoniaco se reabsorbe a en caso de los seres humanos. El restante 25% de los través del sistema portal y se convierte de nuevo en urea casos, según Lott JA (24), se debe a otras causas, en el hígado. El aumento de niveles de amonio incluyendo las inducidas por fármacos e hiperlipemia.
sanguíneo indicará una disminución en la síntesis ureicapor daño hepático. Los niveles de urea encontrados en Otras pruebas realizadas están vinculadas con la nuestro trabajo indican un ascenso de esta sustancia capacidad funcional de síntesis de proteínas totales, especialmente en el grupo de hembras tanto del grupo urea, metabolismo de lípidos y carbohidratos por parte tratado como del control, hecho que no se debe al efecto del hígado. Este sintetiza la mayoría de las proteínas del extracto de la planta en estudio sino a otros factores plasmáticas con excepción de las gammaglobulinas que excluido el factor sexo lo que indicaría buena se sintetizan en el retículo endotelial. La disminución de producción de urea a nivel hepático, y probablemente su capacidad funcional por alguna agresión conduce a una disminución de la excreción a nivel renal en un descenso del nivel de todas las proteínas plasmáticas, especialmente de la albúmina. Estas alteraciones no sereflejan inmediatamente ya que la vida media de las De los resultados obtenidos a nivel metabólico podemos proteínas es mayor a 20 días, por lo que esta prueba no es afirmar que a la dosis utilizada del extracto de Proustia útil como test en el daño hepático agudo pero si en berberidifolia el único parámetro bioquímico que es subagudo como es el caso nuestro, y mejor en el crónico.
afectado directamente por el factor tratamiento es el En las enfermedades hepáticas crónicas, especialmente colesterol total, cuyas fracciones (HDL y LDL- la cirrosis, se produce una disminución de la albúmina y colesterol) también sufren variación pero por motivos una elevación de las globulinas (a expensas de las variados. Del estudio se desprende (figuras Nº 1, 2 y 3) gammaglobulinas) y cuando se mide la proteína total que a medida que baja el nivel de colesterol total, que es este efecto se compensa dando niveles normales, por significativo a partir de los catorce días, la fracción que esto, la determinación de las fracciones proteicas tienen disminuye es el c-LDL mientras que el c-HDL presenta más valor diagnóstico. En la hepatitis la proteinemia efecto inverso. Estos dos últimos efectos no atribuidos total se encuentra dentro de los límites normales la directamente al tratamiento (Tabla Nº 4) nos inducen a albúmina discretamente descendida y la gama globulina pensar que la planta en estudio actuaría optimizando el algo aumentada. En las ictericias obstructivas hay funcionamiento del hígado (proceso de metabolización alteraciones pequeñas que dependen de la duración del y excreción) en especial la capacidad excretora lo que proceso. En el caso específico nuestro los resultados confirmaría lo dicho por Patsch W (Patsch, 1989) (Tabla Nº 3) demuestran que la administración de la tasa cuando se refiere a que el hígado es capaz de excretar no afecta la producción de proteínas y albúmina puesto varios gramos de colesterol del organismo a través de las que el comportamiento es similar en el grupo control y heces. En cuanto a los triglicéridos (TG) este parámetro tratado de ambos sexos no existiendo por lo tanto un no fue afectado por el factor tratamiento por lo que sus Medias marginales estimadas de Colesterol Total Medias marginales estimadas de Colesterol Total Figura Nº 01 Comportamiento de la variable DE L dependiente Colesterol Total pos administración del extracto acuoso
de Proustia berberidifolia (tasa). UNJBG. Tl. Efecto del extracto acuoso de Proustia berberidifolia (tasa) sobre los
niveles de Colesterol Total plasmático en las ratas de experimentación. A grupos de 5 ratas hembras y 5 ratas machos se
les administra el extracto en estudio. Los datos que se muestran en el panel A corresponden a los datos que resultan de
comparar ambos grupos de machos, (control y tratamiento). Los datos que se muestran en el panel B corresponden a su
similar pero con hembras. Todos los datos denotan similitud en el comportamiento de esta variable dependiente.
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Figura Nº 2: Comportamiento de la variable dependiente hdl-colesterol pos administración del extracto acuoso de
proustia berberidifolia.(tasa) UNJBG. TACNA. Efecto del extracto acuoso de Proustia berberidifolia (tasa) sobre los
niveles de HDL colesterol plasmático en las ratas de experimentación. A grupos de 5 ratas hembras y 5 ratas machos se
les administra el extracto en estudio. Los datos que se muestran en el panel A corresponden a los datos que resultan de
comparar ambos grupos de machos, (control y tratamiento). Los datos que se muestran en el panel B corresponden a su
similar pero con hembras. Todos los datos denotan similitud en el comportamiento de esta variable dependiente.
Figura Nº 3: Comportamiento de la variable dependiente ldl-colesterol pos administración del extracto acuoso de
proustia berberidifolia.(Tasa) UNJBG. TACNA. Efecto del extracto acuoso de Proustia berberidifolia (tasa) sobre los
niveles de LDL colesterol plasmático en las ratas de experimentación. A grupos de 5 ratas hembras y 5 ratas machos se les
administra el extracto en estudio. Los datos que se muestran en el panel A corresponden a los datos que resultan de
comparar ambos grupos de machos ,(control y tratamiento). Los datos que se muestran en el panel B corresponden a su
similar pero con hembras. Todos los datos denotan similitud en el comportamiento de esta variable dependiente.
niveles se mantienen dentro de los valores basales.
(TGP) inclusive se eleva antes de que aparezcan dañovisible. Los resultados respecto a este tema reportan que A nivel hepático los parámetros que reportan daño el extracto utilizado no tiene efectos nocivos a nivel del hepático y biliar son las transaminasas para el primer hepatocito puesto que los niveles de ambas enzimas no caso y las fosfatasas y las bilirrubinas para el segundo.
se elevan, por el contrario, llama la atención los niveles Las transaminasas son enzimas intracelulares que están disminuidos de forma significativa de TGP encontrados ubicadas en el citoplasma y/o mitocondrias y transfieren en sangre en los animales de experimentación, este grupos amino de un aminoácido a un cetoácido. En aporte refleja el buen funcionamiento del hígado a pesar estados normales aparecen en el plasma en bajísimas del desgaste diario que sufre el hígado y no a una concentraciones, pero en el caso de necrosis celular o incapacidad del hígado para producir estas enzimas por alteración en la membrana plasmática pasan a la sangre necrosis del hepatocito puesto que en esta patología los en grandes cantidades, dependiendo de la extensión y niveles de TGO se elevan significativamente indicando profundidad del daño. De las dos enzimas (TGO, TGP) daño masivo especialmente a nivel mitocondrial en los que determinamos la más especifica indicadora de hepatocitos, suceso que no ocurre en nuestro caso, a lo lesión hepática es la transaminasa glutámicopirúvica que se adicionan las demás pruebas hepáticas que son Revista Ciencia y Desarrollo 2011; 13: 145-151 Estudio toxicológico con Dosis Subaguda de Proustia Berberidifolia (tasa) en ratas de Laboratorio
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Para el caso de daño extrahepático determinamos laconcentración de fosfatasa alcalina aunque no es Izzo AA, Ernst E. Interaction between herbal medicines andprescribed drugs: a systematic review. Drugs 2001; 61 (15): específica para este tipo de órgano con ayuda de otros parámetros se puede inducir a un diagnostico. Lamedición del nivel de fosfatasas alcalinas es el mejor Krumme B, Endmeir R, Vanhaelen M, Walb D. Reversible marcador de enfermedad colestásica hepática. Son Fanconisyn-drome after ingestion of a Chinese herbl enzimas no específicas del hígado y están elevadas “remedy”containing aristolochic acid. Nephrol. Dial.
durante el crecimiento. En el hígado están ubicadas en la Transplant. 2001 Feb; 16 (2): 400-2.
ocurre primariamente en desordenes colestásicos extra ointrahepáticos. La magnitud de la elevación no permite LOTT JA. Wolf PL, (eds,);Clinical Enzimology :A C-Oriented distinguir entre las diferentes patologías obstructivas y Approach. Chicago. Year Book Medical Publishers 1986 las infiltraciones malignas. De hecho mientras más Luper S. A review of plantas used in the treatment of liver elevada es la concentración dosada en sangre más disease: part 1. Altern Med Rev. 1998 Dec; 3 (6): 410-21.
probable es la existencia de colestasis extrahepática.
Particularmente en nuestro estudio encontramos que los Matthews MK Jr. Association of Gonkgobiloba with niveles de fosfatasa alcalina no presentan alteración a lo intracerebral hemorrhage. Neurology. 1998 Jun;50 (6):1933- que se suma que los niveles de bilirrubina total y bilirrubina directa, en ambos casos, no están elevados;lo que nos hace presumir que además de un buen Myer S, Wohlmuth H. Echinacea-associated anaphylaxis.
funcionamiento hepático existe un buen drenaje a nivel de los conductos intra y extrahepáticos.
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Del estudio se concluye que contradictoriamente las Palop V, Cataln C, Rubio E, Martínez Mir I. Ginetomastia en modificaciones observadas son positivas y están un varón y ginseng. Med Clinica. 1999; 112 (9): 758.
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